技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2020-219
南美胎牛血清使用方法:在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,常使用的胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的胎牛血清培養(yǎng)293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據(jù)具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度。南美胎牛血清作用:1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別...
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2020-217
1、收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。2、瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。3、對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。4、建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態(tài),如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于一周內(nèi)與本公...
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2020-213
人黑色素瘤貼壁細胞培養(yǎng)方法如下:1、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,仔細剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30—50倍體積的Hanks液中,此時腦組織比較柔軟,反復吹打即制成細胞懸液。3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,細胞或細胞團快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反復二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細胞成分。4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,通過紗網(wǎng)成紗布過濾,計數(shù)并調(diào)整細胞密度。5、接入培養(yǎng)瓶或皿中,置5%CO2溫箱...
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2020-210
細胞培養(yǎng)步驟:1.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:①準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K:GIBCO,貨號:21127-022);北美胎牛血清,10%;PS1%。②培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。③凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。2.細胞處理:①復蘇細胞:將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)基...
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2020-26
Hyclone培養(yǎng)基是通過代謝途徑設(shè)計開發(fā)的調(diào)節(jié)友好的培養(yǎng)基,以增加制備抗體和抗體片段的工藝產(chǎn)量,用于多種工程雜交瘤和重組骨髓瘤細胞系中的治療用途。培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長,適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。Hyclone培養(yǎng)基特色:1.FBS和其它血清多樣化的血清產(chǎn)品,包括胎牛血清(F...
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