服務(wù)咨詢熱線：
13454455552
13454455552
技術(shù)文章
當(dāng)前位置：首頁(yè)
技術(shù)文章
2019-1213
細(xì)胞（stem-cell）即為起源細(xì)胞，是指尚未發(fā)育成熟的細(xì)胞，它具有多分化潛能和自我復(fù)制的功能，在特定條件下，可以分化成不同的功能細(xì)胞，形成多種組織和器官。這是繼藥物治療和手術(shù)治療后有又一場(chǎng)醫(yī)療革命，被稱之為醫(yī)學(xué)上的奇跡。根據(jù)其分化潛能不同，可分為全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、單能干細(xì)胞。1、全能干細(xì)胞：具有自我更新和分化形成任何類型細(xì)胞的能力，有形成完整個(gè)體的分化潛能，如胚胎干細(xì)胞，目前許多研究工作都是以小鼠胚胎干細(xì)胞為研究對(duì)象展開的，在生產(chǎn)克隆動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、等方面都有重要...
查看更多2019-1212
1、澳洲源胎牛血清內(nèi)毒素檢測(cè)：凝膠法和動(dòng)態(tài)濁度法要求內(nèi)毒素含量≤10EU/ml。2、化學(xué)檢定：包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白(≤0.02%)。3、澳洲源胎牛血清微生物檢查：細(xì)菌和真菌——直接培養(yǎng)法、噬菌體——噬斑法和增殖法支原體——培養(yǎng)法和DNA染色法、牛病毒——細(xì)胞培養(yǎng)法。要求均為陰性。4、促細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)定：(SP2/0-Ag14標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定)a.大增殖濃度≥1.0×106個(gè)/ml、倍增時(shí)間≤20小時(shí)克隆率=(陽(yáng)性孔...
查看更多2019-122
本文以RFectPlasmidDNATransfectionReagent（RFect質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒），作為攜帶質(zhì)粒穿膜的載體物質(zhì)，具體介紹DNA轉(zhuǎn)染方法。圖.用本產(chǎn)品4ul轉(zhuǎn)染1ugpEGFP-C2質(zhì)粒到293T細(xì)胞后，綠色熒光蛋白的表達(dá)情況。貼壁/懸浮細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染-RFect質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染方法步驟:一、貼壁/懸浮細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染操作流程（以24孔板轉(zhuǎn)染為例）A.細(xì)胞接種:1.轉(zhuǎn)染前24小時(shí)左右對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接，接種密度約為每孔0.3~1×105個(gè)細(xì)胞；2.過(guò)夜培養(yǎng)。B.R...
查看更多2019-1123
1、盡可能地減少血清凍融次數(shù)。2、培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。3、培養(yǎng)基保持PH值7.0-7.2。4、嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。5、掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。6、一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁。7、然后，在鏡下觀察細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。8、如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。9、如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況...
查看更多2019-1122
實(shí)驗(yàn)原理脂質(zhì)體(LR)試劑是陽(yáng)離子脂質(zhì)體DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前條件下方面的轉(zhuǎn)染方法之一。轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞。用LR進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，首先需要優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，應(yīng)找出該批LR對(duì)轉(zhuǎn)染某一特定細(xì)胞適合的用量、作用時(shí)間等，對(duì)每批LR都要做。先要固定一個(gè)DNA的量和DNA/LR混合物與細(xì)胞相互作用的時(shí)間，DNA可從1-5ug和孵育時(shí)間6h，開始，按這兩個(gè)參數(shù)繪出相應(yīng)LR需...
查看更多