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技術文章
2019-819
1．RBC的Hb、網織RBC、MCV、MCH、MCHC及RBC體積分布寬度（RDW）是判定貧血類型重要依據：(1)Hb/RBC比值：正常人：Hb/RBC比值為3gHb/L=100萬RBC/μL即3:1。AA、溶血性貧血及繼發(fā)性貧血等屬此類。3:1者即為大細胞高色素性貧血,(2)網織RBC是新生的RBC，可反映造血機能的好壞。正常情況下為0.5~1.0%,代償性反應者多5%。其網織RBC內嗜堿性網織增多，代償性功能減低者，低于正常水平。多見于AA，但有不典型AA（1/4）患者可...
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三、無血清培養(yǎng)基1979年神經細胞培養(yǎng)出現了一個重要進展，用化學添加劑即可維持神經細胞存活與生長而不需要在培養(yǎng)基中添加血清。其工作基礎是用合適的激素、營養(yǎng)物和促貼壁的物質的組合置換培養(yǎng)基中的成分，后找到了適合大多數細胞培養(yǎng)的試劑配方，該配方稱為N2，專門用于神經細胞培養(yǎng)，早是用在B104大鼠神經母細胞瘤細胞系的培養(yǎng)。它的基礎培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉鐵蛋白、腐胺和硒。胰島素和胰島素樣生長因子對于大多數類型細胞的存活和生長有重要作用，硒是谷胱甘肽...
查看更多2019-815
一、基礎培養(yǎng)基絕大多數培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質。廣泛應用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經生物學通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現應用于快速生長的細胞，同MEM含有相同的營養(yǎng)成分，但濃度高...
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早期建立iPS細胞的方法為：利用逆轉錄病毒介導表達4個Yamanaka因子,然后將細胞在ES細胞培養(yǎng)液中培養(yǎng),再用抗性基因篩選多潛能性相關啟動子的激活，如Oct4和Nanog啟動子，在得到細胞形態(tài)相似的iPS細胞后，鑒定iPS細胞的多潛能性。這些方法構建iPS細胞的效率很低,細胞多潛能性不均一,而且有內在安全問題,如病毒的插入突變c-Myc的致癌性,使其仍無法應用于臨床治療。為解決這些安全問題和提高iPS細胞建系的效率,人們從多方面改進構建iPS細胞。1.轉座子技術英國和加拿...
查看更多2019-814
污染是細胞培養(yǎng)技術中面臨的主要問題，某些污染的發(fā)生往往難以察覺及檢測，而且污染源能長期共存于培養(yǎng)體系中。常見污染情況有：1.細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力是否足夠，尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象。可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理2.霉菌：培養(yǎng)液是...
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